ECL增強(qiáng)型發(fā)光液
Catalog NO.：BE6705
Applications ：
Reactivity ：
| 貨號(hào) | 規(guī)格 | 品牌 | 庫(kù)存 | 價(jià)格 | 數(shù)量 | 操作 |
|---|---|---|---|---|---|---|
| BE6705-100 | 50ml+50ml | EASYBIO |
|
|||
| BE6705-500 | 250ml+250ml | EASYBIO |
|
ECL增強(qiáng)型發(fā)光液
規(guī)格
BE6705-100 50ml+50ml
BE6705-500 250ml+250ml
簡(jiǎn)介
本試劑盒優(yōu)化了底物組成，使用了新型高效增強(qiáng)劑，發(fā)光強(qiáng)度比傳統(tǒng)ECL顯色液提高了30-50 倍，并有效地降低了背景。試劑盒使用新的氧化劑代替不穩(wěn)定的雙氧水，提高了試劑盒的穩(wěn)定性，室溫可穩(wěn)定放置 1 年。工作液被 HRP 催化后，發(fā)出特定波長(zhǎng)熒光（400-450 nm），可對(duì) X 光膠片曝光，也可直接使用熒光 CCD 掃描，主要應(yīng)用于Western檢測(cè)以及化學(xué)發(fā)光免疫檢測(cè)系統(tǒng)。
緩沖液用量
一抗工作濃度：0.2-1.0 μg/mL；
HRP標(biāo)記二抗工作濃度：10-500 ng/mL，根據(jù)二抗效價(jià)調(diào)整；
顯色液的使用比例：Solution I : Solution II = 1:1；10 cm2 轉(zhuǎn)印膜使用1-2 mL工作液。
操作步驟
根據(jù)常規(guī)操作轉(zhuǎn)印結(jié)束后，進(jìn)行封閉、一抗孵育、二抗孵育以及必要的洗膜步驟，根據(jù)膜的大小，按每 10cm2 膜使用 1-2mL 工作液，按比例吸取等體積溶液 I 和溶液 II 混勻，配制成發(fā)光檢測(cè)工作液。用 平頭鑷子將膜取出，膜的下緣輕輕接觸吸水紙，去除膜上多余的液體。用移液器將工作液加到轉(zhuǎn)印膜上，使其均勻覆蓋，室溫孵育 1-2 分鐘，此步驟可在潔凈保鮮膜上或塑料盒中完成。
X光膠片法
1) 用平頭鑷子夾起轉(zhuǎn)印膜，膜的下緣輕輕接觸吸水紙，去除膜上多余的液體，留下少量工作液，不要讓膜完全干燥。膜的蛋白面朝上，包裹于潔凈保鮮膜內(nèi)。輕輕趕出其間的氣泡，用小塊透明膠帶粘住四角，固定在X光片暗盒內(nèi)。
2) 在暗室中取一張X 光膠片置于包裹的膜上，合上暗盒，曝光30秒至1分鐘。立即定影、顯影，根據(jù)曝光強(qiáng)度，調(diào)整下一張 X 光膠片的曝光時(shí)間。如果背景過(guò)高，可以使用兩張 X
光膠片同時(shí)壓片。
熒光拍照法
1) 如果需要使用CCD拍照，可以將膜放置于工作液中，開(kāi)機(jī)后按照使用說(shuō)明，將轉(zhuǎn)印膜取出，進(jìn)行拍照。
2） 可以根據(jù)背景情況，調(diào)整機(jī)器測(cè)量參數(shù)，提高信噪比。
管式化學(xué)發(fā)光法
1) 將魯米諾的化學(xué)發(fā)光檢測(cè)波長(zhǎng)可設(shè)定在 425nm 左右，可以選擇單點(diǎn)測(cè)量，或者取多次平均值。
2) 按照機(jī)器要求，將配制好的工作液加入到樣品管中，間隔一定時(shí)間測(cè)量發(fā)光強(qiáng)度。
[4]Guo Z, Jiang N, Li M, Guo H, Liu Q, Qin X, Zhang Z, Han C, Wang Y. A vicinal oxygen chelate protein facilitates viral infection by triggering the unfolded protein response in Nicotiana benthamiana. J Integr Plant Biol. 2024 Jul;66(7):1481-1499. doi: 10.1111/jipb.13667. Epub 2024 May 2. PMID: 38695653.
[5]Wu, J., Chen, S., Wang, C., Lin, W., Huang, C., Fan, C., Han, D., Lu, D., Xu, X., Sui, S., & Zhang, L. (2023). Regulatory dynamics of the higher-plant PSI-LHCI supercomplex during state transitions. Molecular plant, 16(12), 1937–1950. https://doi.org/10.1016/j.molp.2023.11.002
[6]Guo, Z. H., Qin, X. Y., Guo, H. F., Zheng, C., Zhang, Z. Y., Chen, Q., Wang, X. B., Han, C. G., & Wang, Y. (2025). The E3 ligase HRD1 enhances plant antiviral immunity by targeting viral movement proteins. Cell reports, 44(4), 115449. Advance online publication. https://doi.org/10.1016/j.celrep.2025.115449
